Metoda barwienia fluorescencyjnego LIVE/DEAD BacLight™ w badaniach stanu fizjologicznego Lactobacillus spp.

• Autorzy: Magdalena A. Olszewska , Aleksandra M. Kocot , Iwona Motuk , Łucja Łaniewska Trokenheim

Warianty tytułu

Fluorescent Staining Method with Use of LIVE/DEAD Baclight™ Kit in Studies on Physiological State of Lactobacillus spp.

• Języki publikacji: PL

Abstrakty

W niektórych gałęziach przemysłu bakterie Lactobacillus spp. mogą być niepożądane i odpowiedzialne za wady produktów, np. w browarnictwie czy winiarstwie. Ich obecność w środowisku przemysłowym jest wynikiem przystosowania się do niekorzystnych warunków, choć nie wszystkie mechanizmy są w pełni poznane. Celem podjętych badań była ocena stanu fizjologicznego komórek Lactobacillus spp. poddanych działaniu stresu wywołanego środkami dezynfekcyjnymi. Analizę przeprowadzono za pomocą barwienia fluorescencyjnego LIVE/DEAD BacLight™, które pozwoliło określić żywotność komórek na podstawie ciągłości błon cytoplazmatycznych oraz metodą posiewów płytkowych do oznaczenia liczby bakterii tworzących kolonie. Różnica między żywotnością a hodowalnością bakterii wykazała obecności komórek w stanie niehodowalności VBNC (ang. viable but nonculturable). Tego rodzaju obserwacje wskazują na potrzebę szerszego zgłębienia fizjologii Lactobacillus spp. w odpowiedzi na stresy środowiskowe. Badania z tego zakresu mogą być również istotne dla kontroli mikrobiologicznej środowiska przemysłowego. (abstrakt oryginalny)

EN

In some industries, Lactobacillus spp. may be undesirable and responsible for defects in food products as, e.g., in the brewing or wine-making industries. Their occurrence in the food processing environment results from their adaptation to adverse conditions; however, not all of the mechanisms have been fully identified. The objective of the research study was to evaluate the physiological state of Lactobacillus spp. cells exposed to disinfectants-induced stress. The analysis was performed using a fluorescent staining method with a LIVE/DEAD BacLight™ kit so as to make it possible to determine the viability of cells based on the integrity of cytoplasmic membrane, as well as a culture plating method to estimate the count of colony-forming bacteria. The difference between the viable and culturable cell counts proved the occurrence of VBNC (viable but non-culturable) cells. These observations indicate that there is a need to better explore the physiology of Lactobacillus spp. cells responding to environmental stresses. The studies in this domain may also be significant for microbiological control of the food processing environment. (original abstract)

Słowa kluczowe

PL

Jakość mikrobiologiczna; Jakość produktów żywnościowych; Mikrobiologia; Wyniki badań

EN

Microbiological quality; Quality of food products; Microbiology; Research results

• Czasopismo: Żywność: nauka - technologia - jakość
• Rocznik: 23 (2016)
• Numer: nr 5 (108)
• Strony: 72--81

Twórcy

autor

Magdalena A. Olszewska

• Uniwersytet Warmińsko-Mazurski w Olsztynie

autor

Aleksandra M. Kocot

• Uniwersytet Warmińsko-Mazurski w Olsztynie

autor

Iwona Motuk

• Uniwersytet Warmińsko-Mazurski w Olsztynie

autor

Łucja Łaniewska Trokenheim

• Uniwersytet Warmińsko-Mazurski w Olsztynie

Bibliografia

• [1] Blasco L., Ferrer S., Pardo I.: Development of specific fluorescent oligonucleotide probes for in situ identification of wine lactic acid bacteria. FEMS Microbiol. Lett., 2003, 225, 115-123.
• [2] Bonin S.: Zakażenia mikrobiologiczne podczas produkcji wina. Agro Przemysł, 2005, 1, 26-28.
• [3] Dahm H., Strzelczyk E.: Żyjące, lecz nie dające się hodować bakterie. Post. Mikrobiol., 2004, 43 (3), 251-265.
• [4] Garía-Hernández J., Moreno Y., Amorocho C.M., Hernández M.: A combination of direct viable count and fluorescence in situ hybridization for specific enumeration of viable Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus and Streptococcus thermophilus. Lett. Appl. Microb., 2011, 54, 247- 254.
• [5] Jach M., Łoś R., Maj M., Malm A.: Probiotyki - aspekty funkcjonalne i technologiczne. Post. Mikrobiol., 2013, 52 (2), 161-170.
• [6] Langsrud S., Sidhu M.S., Heir E. Holck A.L.: Bacterial disinfectant resistance - a challenge for the food industry. Int. Biodeterior. Biodegrad., 2003, 51, 282-290.
• [7] Meneghin S.P., Reis F.C., De Almeida P.G., Ceccato-Antonini S.R.: Chlorine dioxide against bacteria and yeasts from the alcoholic fermentation. Braz. J. Microbiol., 2008, 39, 337-343.
• [8] Meyer P., Dworkin J.: Applications of fluorescence microscopy to single bacterial cells. Res. Microbiol., 2007, 158, 187-194.
• [9] Mikš M., Warmińska-Radyko I.: Wybrane techniki fluorescencyjne w badaniach stanu fizjologicznego i przeżywalności komórek bakteryjnych w żywności. Med. Weter., 2008, 64, 623- 628.
• [10] Moreno Y., Collado M., Ferrus M., Cobo J., Hernandez E., Hernandez M.: Viability assessment of lactic acid bacteria in commercial dairy products stored at 4 ºC using LIVE/DEAD BacLight staining and conventional plate counts. Int. J. Food Sci. Tech., 2006, 41, 275-280.
• [11] Oliver J.D.: The viable but nonculturable state in bacteria. J. Microbiol., 2005, 43, 93-100.
• [12] Olszewska M.: Metody biologii molekularnej w mikrobiologii żywności. Przem. Spoż., 2013, 67 (2), 10-14.
• [13] Olszewska M., Łaniewska-Trokenheim Ł.: Badania stanu "niehodowalności" komórek bakterii fermentacji mlekowej w niesprzyjających warunkach rozwoju. Med. Weter., 2011, 67 (2), 105-109.
• [14] Olszewska M., Łaniewska-Trokenheim Ł.: Odpowiedź bakterii fermentacji mlekowej na stres - stadium VBNC. Żywność. Nauka. Technologia. Jakość, 2013, 5 (90), 15-28.
• [15] Paszyńska-Wesołowska I., Bartoszcze M.: Bakterie w stadium VBNC - zagrożenie dla zdrowia człowieka. Med. Weter., 2009, 65 (4), 228-231.
• [16] Sidhu, M., Langsrud, S., Holck, A.: Disinfectant and antibiotic resistance of lactic acid bacteria isolated from food industry. Microbial Drug Resistance, 2001,7, 73-83.
• [17] Varnam A.: Lactobacillus: occurrence and significance in non-dairy foods. Microbiology Today, 2002, 29, 13-17.
• [18] Warmińska-Radyko I., Olszewska M., Mikš-Krajnik M.: Effect of temperature and sodium chloride on the growth and metabolism of Lactococcus strains in long-term incubation of milk. Milchwissenschaft, 2010, 65, 32-35.
• [19] Żyrek E.: Zagrożenia mikrobiologiczne przy "aseptycznym" rozlewie piwa. Agro Przemysł, 2008, 6, 23-28.

Identyfikatory

DOI

10.15193/zntj/2016/108/150